Родилась 7 апреля 1949 в г. Шепетовка Хмельницкой области Украинской ССР, украинка.
В 1964 - 67 училась в медицинском училище г. Черкассы, УССР.
В 1972 окончила Ленинградский химико-фармацевтический институт по специальности "провизор", в 1985 - Академию общественных наук.
С 1972 - на общественной работе.
В 1977 - 84 - секретарь, второй секретарь, первый секретарь Ленинградского обкома ВЛКСМ.
С 1984 - первый секретарь Красногвардейского райкома КПСС г. Ленинграда.
С 1986 - заместитель председателя исполкома Ленинградского Совета народных депутатов.
В 1989 была избрана народным депутатом СССР.
С 1989 - председатель Комитета Верховного Совета СССР по делам женщин, охраны семьи, материнства и детства, член Президиума Верховного Совета (по должности).
С 1990 - слушатель Курсов усовершенствования руководящих дипломатических работников при Дипломатической академии МИД СССР.
С мая 1991 по 1995 - Чрезвычайный и Полномочный Посол СССР (затем - РФ) в Республике Мальта.
С 17 июля 1995 - директор Департамента по связям с субъектами федерации, парламентом и общественно-политическими организациями (ДСПО) МИД РФ.
С сентября 1997 - Чрезвычайный и Полномочный Посол РФ в Греческой Республике.
С 24 сентября 1998 - заместитель Председателя Правительства РФ.
С 25 мая 1999 - вице-премьер Правительства РФ.
С 7 мая 1999 - член коллегии представителей государства в ОАО "Общественное российское телевидение" (ОРТ). С 8 июня - член совета директоров АО "ОРТ".
20 ноября 1999 в результате дорожно-транспортного происшествия В.
Матвиенко получила закрытую черепно-мозговую травму, скальпированную рану лобной области и разрыв связок.
3 февраля 2000 была выдвинута группой избирателей кандидатом на пост Президента РФ, но баллотироваться не стала.
10 марта 2000 в Санкт-Петербурге объявила о вступлении в избирательную кампанию по выборам губернатора Санкт-Петербурга.
5 апреля 2000 официально отказалась баллотироваться на пост губернатора Санкт-Петербурга.
С 18 мая 2000 - заместитель Председателя Правительства РФ.
Владеет немецким и английским языками.
Имеет дипломатический ранг Чрезвычайного и Полномочного Посла.
Почетный доктор Российской военно-медицинской академии (с февраля 1999).
Имеет государственные награды.
Хобби - теннис.
Замужем. Муж, Владимир Васильевич, - полковник медслужбы Военно-медицинской академии. Сын Сергей - студент (1998).
